dna大小與電泳膠濃度
常油17571053483咨詢： 有哪些因素會(huì)影響到電泳圖譜上DNA條帶的位置? -
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______[答案] 影響的因素很多.主要的有: 1、 DNA的分子大小: 線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對(duì)數(shù)成反比,分子越大則所受阻力越大,遷移得越慢. 2、 瓊脂糖濃度 一個(gè)給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度...
常油17571053483咨詢： DNA提取出來(lái),不進(jìn)行PCR,能直接跑電泳嗎?如果可以,那用的瓊脂糖凝膠是幾乘的? -
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______ 一般情況下不行,直接從樣品中提取的DNA模板量都比較少,直接電泳的話容易出現(xiàn)假陰性的結(jié)果,如果你的實(shí)驗(yàn)還有其他的地方要用到DNA(比如核酸序列分析),直接從樣本提取尤其比較珍貴的樣本提取的DNA的量是滿足不了你整個(gè)實(shí)驗(yàn)的要求的
常油17571053483咨詢： 影響核酸泳動(dòng)距離的因素有哪些 -
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______ 1、核酸的性質(zhì) 核酸的電荷量,分子大小,分子的空間構(gòu)象等決定了不同的核酸分子具有不同的遷移率.對(duì)于線狀雙鏈DNA分子,在凝膠電泳中,分子量的常用對(duì)數(shù)與泳動(dòng) 率成反比關(guān)系,一般雙鏈DNA基本上不存在影響遷移率的復(fù)雜構(gòu)象,但...
常油17571053483咨詢： PCR擴(kuò)增一個(gè)500bp大小的DNA片段,若用凝膠電泳檢測(cè),用多大濃度的瓊脂糖凝膠 -
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______ 1%的瓊脂糖凝膠即可,還要選好DNA marker
常油17571053483咨詢： 小于1kb的DNA用什么電泳? -
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______ 小于1kb的DNA很常見(jiàn)啊,就是用瓊脂糖凝膠電泳啊,不同大小的DNA可以用不同濃度的瓊脂糖進(jìn)行電泳.因?yàn)橐话憔郾０冯娪臼怯脕?lái)跑蛋白質(zhì)的,所以有時(shí)候這么叫,但是這是兩個(gè)不同的概念.聚丙烯酰胺凝膠是一種材料,除了可以跑蛋白質(zhì),也可以跑DNA,單鏈的雙鏈的變性的不變形的梯度的非梯度的都可以跑,這只不過(guò)是一種技術(shù)手段而已.而蛋白質(zhì)電泳就是跑蛋白質(zhì)的電泳,可以在各種材料載體上跑,除了聚丙烯酰胺以外,還有NC膜等也可以跑蛋白質(zhì).PS:瓊脂糖電泳的孔徑應(yīng)該比聚丙烯酰胺的孔徑小.
常油17571053483咨詢： 電泳時(shí)決定凝膠濃度的參數(shù)是什么 -
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______ 待分離組分分子量大小. 瓊脂糖濃度 一個(gè)給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同.DNA電泳遷移率的對(duì)數(shù)與凝膠濃度成線性關(guān)系.凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小.分離小于0.5kb的DNA片段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大于10kb的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%, DNA片段大小間于兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0%. 聚丙烯酰胺差不多. 原理: 濃度高的交聯(lián)程度高,孔徑小,適合分子量小的組分. 反之,交聯(lián)程度低,孔徑大,適合分子量大的組分.
常油17571053483咨詢： DNA酶切及凝膠電泳的基本描述 -
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______ 限制性內(nèi)切酶能特異地結(jié)合于一段被稱為限制性酶識(shí)別序列的DNA序列之內(nèi)或其附近的特異位點(diǎn)上,并切割雙鏈DNA.它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質(zhì)分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在.Ⅰ類酶結(jié)合于識(shí)別位...
常油17571053483咨詢： 你好,我想問(wèn)一下,有關(guān)瓊脂糖凝膠電泳的問(wèn)題. -
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______ 瓊脂糖凝膠電泳只能分離20KD一下的片段?首先這個(gè)表述有問(wèn)題,不是20KD,KD是描述蛋白分子量的,應(yīng)該是DNA或者RNA片段20kb吧,瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長(zhǎng)度從200bp至近50kb的DNA片段...
常油17571053483咨詢： 關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳圖片分析
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______ 條帶分開的程度看你實(shí)驗(yàn)的需求.如果你的Marker相鄰兩個(gè)條帶相差100bp,而你的樣本陽(yáng)性結(jié)果和多帶一個(gè)內(nèi)含子的假陽(yáng)性結(jié)果只差50bp(比方說(shuō)你在做反轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn))那你當(dāng)然需要分清楚一些.否則的話只要看得清楚你的樣本條帶是位于...
常油17571053483咨詢： 為何DNA電泳時(shí)條帶很好,但是濃度卻很低? -
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______ 儀器測(cè)定濃度本身誤差比較大,通常是根據(jù)marker條帶對(duì)應(yīng)的濃度來(lái)估算目的條帶所對(duì)應(yīng)濃度,這種方法更加準(zhǔn)確
