qpcr計(jì)算基因表達(dá)量
漫知15681415805咨詢： 如何采用QPCR檢測超低表達的目的基因 -
藤縣成進給回復：
______ 把需要研究的基因稱為目的基因.(一般把需要分析的基因稱靶基因,在基因克隆過程中有時兩者均稱為插入基因,有時三者含義相近.所以有時有些書本上也籠統(tǒng)的稱“用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因(靶基因)”)
漫知15681415805咨詢： 如何對qPCR數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析 -
藤縣成進給回復：
______ 如果避免了預擴增,數(shù)據(jù)可轉(zhuǎn)換成絕對的cDNA數(shù)量,否則數(shù)據(jù)分析可以Cq值來開展,因為每個細胞的轉(zhuǎn)錄本水平呈對數(shù)正態(tài)分布.一開始,可以各種方法對數(shù)據(jù)作圖,此外,基本的統(tǒng)計分析也應開展(如陽性細胞的數(shù)量、平均值和偏差).細...
漫知15681415805咨詢： 高中生物:DD表示顯性性狀,為什么Dd也表示顯性性狀? -
藤縣成進給回復：
______ D代表顯性,之所以為顯現(xiàn)是因為能掩蓋d代表的隱性性狀,只有dd時代表隱性性狀
漫知15681415805咨詢： 如圖表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,SmaⅠ是一種限制性核酸內(nèi)切酶,它識 -
藤縣成進給回復：
______ SmaⅠ識別的堿基序列和酶切位點是CCC↓GGG,由圖可知基因D中含有2個SmaⅠ的酶切位點.若圖中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,則基因D就突變?yōu)榛騞,且基因d只有一個SmaⅠ的酶切位點.雜合子的基因型為Dd,從雜合子中分離出如圖的DNA片段,即基因D,而基因D會被SmaⅠ切割形成三個片段,其長度分別為537bp、790bp、661bp,所以產(chǎn)物中不同長度的DNA片段共有3種. 故選:B.
漫知15681415805咨詢： 如何獲得基因上游5'調(diào)控區(qū)的序列 -
藤縣成進給回復：
______ 如何獲得基因上游5'調(diào)控區(qū)的序列 一、掌握基因表達(gene expression)的定義及概念:基因表達是指生物基因組中結構基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程,合成特定的蛋白質(zhì),進而發(fā)揮其特定的生物學功能和生物學效應的全...
漫知15681415805咨詢： 何檢驗目的基因基因已經(jīng)表達 -
藤縣成進給回復：
______ 細胞水平:如果轉(zhuǎn)進去的目的基因帶有標記,例如熒光,那么用倒置熒光顯微鏡就可以看到,有熒光,則基因表達,當然這必須細胞本身沒有熒光才行.蛋白水平:將樣品收集,裂解,用蛋白免疫印記法(Western Blot)來檢測,根據(jù)曝光條帶判斷有無目的蛋白的表達,從而證實基因的表達.分子水平:樣品提RNA,做逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR),之后以逆轉(zhuǎn)錄完成的cDNA為模板,用設計好的引物對此模板進行PCR擴增,之后電泳檢測,看是否有目的基因DNA;或者直接用實時定量熒光PCR(QPCR)來檢測目的基因的表達(根據(jù)圖譜來看).
