takara反轉(zhuǎn)錄酶說明書
澄呼17550823073咨詢： 有誰知道做RT - PCR需要哪些試劑?不買試劑盒的話,謝謝 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 做反轉(zhuǎn)錄需要用到的試劑: 反轉(zhuǎn)錄酶 反轉(zhuǎn)錄酶buffer RNA酶抑制劑 dNTP 反轉(zhuǎn)錄引物(oligo(DT)) PCR用到的試劑 dNTP Taq酶 Taq酶buffer 上下游引物 反轉(zhuǎn)錄cDNA模板
澄呼17550823073咨詢： 要做全轉(zhuǎn)錄組需要多少量的rna -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ DNA的量≥20μl,濃度≥50ng/μl,每個樣最好做三個重復(fù). 測序策略:PE100或PE125 建議數(shù)據(jù)量: 真核生物: 一般測序:5~6Gb 深度測序:10Gb 原核生物: 一般測序:1Gb 深度測序:5~10Gb
澄呼17550823073咨詢： 為什么使用限制性內(nèi)切核酸酶對基因組dna 進行部分酶切 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 基因工程操作中涉及一系列相互關(guān)聯(lián)的酶促反應(yīng).已經(jīng)知道有許多重要的核酸酶,如限制性內(nèi)切核酸酶、外切核酸酶、dna連接酶、DNA聚合酶、反轉(zhuǎn)錄酶、DNA及RNA的修飾酶等,在基因工程的操作中有著廣泛的用途. 1.限制性內(nèi)切核酸酶 ...
澄呼17550823073咨詢： Takara的T4連接酶反應(yīng)產(chǎn)物可否直接用于轉(zhuǎn)化 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 可以,連接體系不要超過15ul,連接過夜后全部加入100ul感受態(tài)宿主菌中做轉(zhuǎn)化.
澄呼17550823073咨詢： 雙酶切的20μL反應(yīng)體系和反應(yīng)時間如何確定?最好是說明原理.所用的酶都是Takara公司的 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______[答案] 模板DNA 幾百ng-幾ug,區(qū)別不大 酶1 0.5ul 酶2 0.5ul buffer 去Takara產(chǎn)品目錄查雙酶切buffer表,按照那個倍數(shù)加,有時候需要BSA 水補足 20ul 30或37度,1-5小時都可以.有個別酶需要55度. 注意,酶別加多了,甘油濃度過高影響酶的活性.反應(yīng)體系...
澄呼17550823073咨詢： 我想向你請教一個問題,你曾經(jīng)做逆轉(zhuǎn)錄最終oligoDT18(takara)用了幾ul?我用的逆轉(zhuǎn)錄酶和你的一樣 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______[答案] 不好意思,才看到,我是50uM的濃度用了2ul,總體積是20ul.
澄呼17550823073咨詢： 反轉(zhuǎn)錄酶的作用是什么? -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 反轉(zhuǎn)錄酶是能促使將遺傳信息由RNA傳遞給DNA的酶,亦叫逆轉(zhuǎn)錄酶.此酶是一種依賴于RNA的DNA聚合酶,它以RNA為模板催化合成DNA.1970年從致癌RNA病毒中發(fā)現(xiàn)了反轉(zhuǎn)錄酶,并認為此酶與病毒的致癌性質(zhì)有關(guān).反轉(zhuǎn)錄酶也分布于某些正常細胞和胚胎細胞.反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)表明不能把生物的遺傳信息由DNA→mRNA→蛋白質(zhì)絕對化,遺傳信息也可以從RNA傳遞到DNA.它促進了分子生物學、生物化學和病毒學的研究,已成為研究這些學科的有力工具.
澄呼17550823073咨詢： takata RT - PCR試劑盒反轉(zhuǎn)錄酶多少度滅活 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 70度或者72度15min~說明書里面有吧~
澄呼17550823073咨詢： 反轉(zhuǎn)錄問題求教!!! -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 如果你是用反轉(zhuǎn)錄后的cDNA跑電泳,出現(xiàn)好多條帶或彌散狀是正常的,因為你提取的RNA不可能是完整的一條鏈,而隨機引物和特異引物擴增的時候是有肯能把大小不同的RNA同時進行擴增的.你可以用你的目的引物,用反轉(zhuǎn)錄第一鏈進行擴增,看看能不能得到目的片段.
澄呼17550823073咨詢： 反轉(zhuǎn)錄酶的簡介 -
通海縣移曲線回復(fù)：
______ 這是一種莫洛尼鼠白血病病毒(Moloneymurineleukeminvirus)反轉(zhuǎn)錄酶(簡稱M-MLVRTase),這個酶已經(jīng)作了遺傳性上的改變,即除去了與它聯(lián)在一起的核糖核酸酶H活性(一種專門切割DNA與RNA雜交鏈上RNA分子的酶).這個酶應(yīng)用于...
