核酸ct值385需要復(fù)查
聞良18957148181咨詢： 做real time pcr設定內對照時,內對照需要做復孔么 -
晉中市槽錐端回復：
______ 當然要做復孔.
聞良18957148181咨詢： PCR熒光定量 -
晉中市槽錐端回復：
______ 間隔也很小,都在0.4左右-----估計你沒有擴出目的DNA片段,檢測到的信號都是引物二聚體跟SYBR結合的結果. 我懷疑你的PCR條件還沒調整至最佳條件.你先用濃度最大的那個質粒做模板,進行定性PCR,然后跑電泳,觀察是否有目的條...
聞良18957148181咨詢： 什么是數(shù)字PCR (Digital PCR) -
晉中市槽錐端回復：
______ 數(shù)字PCR是一種DNA絕對定量技術.當前DNA定量有三種,光度法基于DNA分子的吸光度來定量;實時熒光定量也就是real time-PCR基于Ct值,也就是可以檢測到熒光值對應的循環(huán)數(shù)定量;數(shù)字PCR是最新的定量技術,他基于單分子PCR方法來采用計數(shù)的方法對DNA進行定量,因此是一種絕對定量的工具.主要采用當前分析化學熱門研究領域-微流控的方法,將大量的稀釋后的DNA溶液分散至芯片的微反應器中,每個反應器的DNA模板數(shù)少于或者等于1個.這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個DNA模板的反應器就會亮,沒有DNA模板的反應器就是暗的.根據(jù)相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的DNA濃度.
