瓊脂糖凝膠的濃度如何選擇
屠邰13776104789咨詢: 凝膠電泳配制的濃度不同,有時(shí)需要百分一,有時(shí)需要百分二.如何確定濃度? -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 瓊脂糖凝膠濃度2113與分辨5261DNA大小范圍的關(guān)系 瓊脂糖4102凝膠濃度/(1653%)版可分辨的線性DNA大小范圍/(kb) 0.3 60~權(quán)5 0.6 20~1 0.7 10~0.8 0.9 7~0.5 1.2 6~0.4 1.5 4~0.2 2.0 3~0.1
屠邰13776104789咨詢: 在做瓊脂糖凝膠電泳時(shí),如果膠的濃度不合適,會(huì)發(fā)生什么情況 -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 一般要根據(jù)要電泳分離的核酸的分子量大小:分子量大的核酸電泳時(shí)使用濃度較小的凝膠,分子量小的核酸電泳時(shí)使用濃度較大的凝膠.核酸在濃度越大的凝膠中電泳速度越小.如果膠濃度偏高,可能跑不動(dòng),如果膠濃度偏低,可能跑得太快,分不開. 可以查到核酸分子大小與瓊脂糖濃度范圍的對(duì)應(yīng)關(guān)系.
屠邰13776104789咨詢: 低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠怎么配制? -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______[答案] 瓊脂糖凝膠的配制 ⑴瓊脂糖凝膠的制備:稱取0.3g瓊脂糖,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,將該三角瓶置于微波爐加熱至瓊脂糖溶解.將冷卻至65℃...
屠邰13776104789咨詢: 想將2700bp和3300bp盡可能分開,電泳時(shí)瓊脂糖凝膠最佳濃度應(yīng)為多?
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 相差600bp,平時(shí)1%的膠能略微區(qū)分,所以覺(jué)得1.5%-2%應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題........
屠邰13776104789咨詢: 如何選用瓊脂糖凝膠電泳時(shí)的marker -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 如果是核酸marker比較簡(jiǎn)單吧,就是看marker條帶的大小和你的目標(biāo)條帶的關(guān)系,盡量選擇目標(biāo)條帶接近分子量的marker,或是在目標(biāo)分子量附近條帶較多的marker. 另外就是,如果目標(biāo)分子量很小,凝膠通常選擇的濃度較大,就不能用分子量太大的marker,例如,只檢測(cè)200bp的條帶,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比較合適. 如果分子量很大,例如在幾k,就可能會(huì)選擇向lamda HindIII這樣最大到23K的marker.否則凝膠濃度不合適,marker條帶分不開,影響對(duì)你目標(biāo)分子分子量的判斷.
屠邰13776104789咨詢: 低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠怎么配制? -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 搜索了很久終于找到啦!哈哈!不要太感謝哥哈!1. 瓊脂糖凝膠的制備 ⑴瓊脂糖凝膠的制備:稱取0.3g瓊脂糖,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液...
屠邰13776104789咨詢: 瓊脂糖凝膠怎么配制? -
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 你好,瓊脂糖凝膠的配制是分子實(shí)驗(yàn)室比較基本的操作,因此正確地操作對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)講很有必要,大體流程如下:稱量、熔膠、倒膠、拔梳. 1.稱量 我們通常所說(shuō)的0.8%、1%的膠都是指的質(zhì)量體積分?jǐn)?shù),即所稱取的瓊脂糖粉的質(zhì)量(g)比...
屠邰13776104789咨詢: DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移速率的影響因素哪些?DNA在瓊脂糖
荔波縣量摩擦回復(fù):
______ 1、DNA的分子大小及構(gòu)型 不同構(gòu)型DNA的移動(dòng)速度次序?yàn)?供價(jià)閉環(huán)DNA(... 線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對(duì)數(shù)成反比,分子越大...