瓊脂糖凝膠電泳缺點(diǎn)
【實(shí)驗技術(shù)】瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析(帶案例)
瓊脂糖凝膠電泳作為分子實(shí)驗的核心技術(shù)，利用核酸分子在電場中的電荷效應(yīng)和瓊脂糖的分子篩特性，實(shí)現(xiàn)了對核酸混合物的高效分離。質(zhì)粒的形態(tài)多樣，線型因其接近全質(zhì)粒理論大小而電泳速度最快，超螺旋形態(tài)則在0.6-0.8倍線型大小之間，電泳速度較慢。由于復(fù)制階段的不確定性，質(zhì)粒檢測結(jié)果可能顯示多條帶，需...
瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗失敗原因??
可能性太多了。1. 你跑膠一般都要放MARKER或者叫DNA LADDER吧，這個MARKER除外對DNA標(biāo)記大小以外， 還可以用來監(jiān)控ELECTROPHORESIS的質(zhì)量， 如果MARKER顯示而DNA沒顯示， 說明ELECTROPHORESIS正常而DNA有問題， 如果MARKER和DNA都沒有顯示， 說明是你的電永出現(xiàn)了問題。ELECTROPHORESIS的可能問題有， 1. ...
瓊脂糖凝膠電泳拖尾了怎么辦?
跑過瓊脂糖凝膠電泳的小伙伴，是不是經(jīng)常遇到過電泳拖尾的現(xiàn)象啊？相信不少人點(diǎn)頭如搗蒜了。提個質(zhì)粒拖尾，提個DNA拖尾，連PCR也拖尾，拖尾什么的最常見了。驗證也就算了，關(guān)鍵是圖片拍出來不好看了，發(fā)文章什么的太影響檔次了。下面我就跟據(jù)自己的經(jīng)驗跟大家講講瓊脂糖凝膠電泳為什么會拖尾，有不足的...
瓊脂糖凝膠電泳的原理及影響因素?
瓊脂糖凝膠電泳是常用的生物化學(xué)實(shí)驗方法，用于分離和分析DNA、RNA或蛋白質(zhì)等生物大分子。瓊脂糖凝膠電泳的原理是利用凝膠孔徑大小的差異來實(shí)現(xiàn)生物大分子的分離。瓊脂糖是一種多糖類物質(zhì)，可以在水中形成凝膠狀的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其中孔徑的大小與瓊脂糖的濃度成反比。當(dāng)電場施加在凝膠上時，帶電的分子會向電場...
瓊脂糖凝膠電泳跑成這樣是怎么回事?
根據(jù)我多年的經(jīng)驗，少年，你的膠背景亮說明你的UV開得太亮了，正常時候不需要這么強(qiáng)光就能看到條帶。從你膠的樣子可以看出，你跑膠的時間太長了，看樣子你用的是SYBR green，這種染料在你電泳的時候是會向條帶相反方向移動的，跑時間太長，造成你的膠這樣下面一部分已經(jīng)看不到marker和背景亮光了。而...
瓊脂糖凝膠電泳中正負(fù)極插反的后果
導(dǎo)致結(jié)果無法解讀、凝膠破裂或損壞。1、結(jié)果無法解讀：正負(fù)極插反會導(dǎo)致DNA或RNA在凝膠中的遷移方向與預(yù)期相反。這會使得結(jié)果難以解讀，預(yù)期的條帶位置和大小會發(fā)生變化。2、凝膠破裂或損壞：如正負(fù)極插反，電流方向會導(dǎo)致凝膠破裂或損壞，從而使實(shí)驗無法繼續(xù)進(jìn)行。
瓊脂糖凝膠電泳中dna的影響遷移速度有哪些
瓊脂糖凝膠電泳中dna的影響遷移速度：1、DNA的分子大小及構(gòu)型不同構(gòu)型DNA的移動速度次序為：供價閉環(huán)DNA（covalently closed circular,cccDNA）>直線DNA>開環(huán)的雙鏈環(huán)狀DNA.線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中蠕行。因...
瓊脂糖凝膠電泳的原理 瓊脂糖凝膠電泳的原理介紹
1、瓊脂糖凝膠電泳的原理：瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。2、但由于其孔徑相比于蛋白質(zhì)太大，對大多數(shù)蛋白質(zhì)來說其分子篩效應(yīng)微不...
(急問)DNA瓊脂糖凝膠電泳失敗原因?
你的 DNA標(biāo)準(zhǔn)都沒出來么？一個可能的原因 凝膠沒有用緩沖溶液配制。如果不是這個原因 那么只有一種可能（我看最可能的）：點(diǎn)樣量少，電泳時間太久，本該有的條帶彌散了 或者已經(jīng)跑出去了。我把你的圖片處理了一下 看見了條帶 那就是 你所看到的藍(lán)色位置的下方（前端）顯示白色的地方。你可將其...
瓊脂糖的電泳技術(shù)
此時電泳的遷移率不再依賴于分子大小,因此,就用瓊脂糖凝膠電泳分離DNA時,分子大小不宜超過此值。(2)瓊脂脂糖的濃度 如下表所示,不同大小的DNA需要用不同濃度的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。表 瓊脂糖濃度與DNA分離范圍瓊脂糖濃度 \/% 0.3 0.6 0.7 0.9 1.2 1.5 2.0線狀DNA大小\/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23...
終聞13861317631咨詢： 核酸的瓊脂糖凝膠電泳為什么要用電泳緩沖液配制凝膠 -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 保持合適的pH和離子強(qiáng)度,使電泳順利進(jìn)行.如果配膠的緩沖液與電泳緩沖液不同,電泳時凝膠可能會變形.
終聞13861317631咨詢： 瓊脂糖電泳跑不了膠 -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 一般PCR或RT-PCR的產(chǎn)物電泳時應(yīng)該用>1%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳, 事實(shí)上,很多情況下膠跑得不夠漂亮跟一些微不足道的細(xì)節(jié)有關(guān),有時候做膠前如果梳子沒洗干凈,膠的孔就不夠整齊; 還有點(diǎn)樣時,不要讓槍頭戳到孔的邊沿,尤其是前沿,如果戳缺一點(diǎn).
終聞13861317631咨詢： 瓊脂糖凝膠電泳時,電流過大會有什么影響 -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 電流過大,電泳條帶跑得快,跑出來的條帶不漂亮,而且會出現(xiàn) 電泳條帶跑得快,跑出來的條帶不漂亮,降低分辨率,更嚴(yán)重的可能會導(dǎo)致小片段跑出膠而出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象,那又得重來了~
終聞13861317631咨詢： 瓊脂糖凝膠電泳的操作流程是怎樣的?
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 瓊脂糖凝膠電泳操作流程編輯準(zhǔn)備干凈的配膠板和電泳槽瓊脂糖凝膠電泳:水平電泳注意DNA酶污染的儀器可能會降解DNA,造成條帶信號弱、模糊甚至缺失的現(xiàn)象
終聞13861317631咨詢： 為什么瓊脂糖凝膠電泳的條帶拖了一條長尾巴? -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 電泳出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象,英文成為smear,就是彌散.其原因,主要從以下兩個方面考慮: 1、PCR產(chǎn)物自身原因: 往往由于酶量過多或酶的質(zhì)量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環(huán)次數(shù)過多,而造成PCR的非特異性產(chǎn)物過多...
終聞13861317631咨詢： SDS電泳和瓊脂糖電泳的區(qū)別 -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 你說的SDS電泳實(shí)際上是SDS-PAGE,SDS只是蛋白變性劑,而凝膠是聚丙烯酰胺.SDS-PAGE和瓊脂糖凝膠電泳使用的是完全不同的凝膠材料.SDS-PAGE采用的是聚丙烯酰胺,它是靠化學(xué)反應(yīng)形成的凝膠.而瓊脂糖凝膠則是物理反應(yīng)(加...
終聞13861317631咨詢： DNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗中可替代DNA的染料EB的電泳染料有哪些?優(yōu)缺點(diǎn)各是什么? -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______[答案] 目前為止,對身體低毒、穩(wěn)定而靈敏度不輸于EB的核酸染料只有sybr green ,和 gelred 這兩個的優(yōu)點(diǎn)都是低毒性,而且穩(wěn)定性很高,但是sybr green 的靈敏度不如EB,且背景熒光很強(qiáng),但普通的核酸檢測都能做到; gelred 是目前...
終聞13861317631咨詢： 在做瓊脂糖凝膠電泳時,如果膠的濃度不合適,會發(fā)生什么情況
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 一般要根據(jù)要電泳分離的核酸的分子量大小:分子量大的核酸電泳時使用濃度較小的凝膠,分子量小的核酸電泳時使用濃度較大的凝膠.核酸在濃度越大的凝膠中電泳速度越小.如果膠濃度偏高,可能跑不動,如果膠濃度偏低,可能跑得太快,分不開. 可以查到核酸分子大小與瓊脂糖濃度范圍的對應(yīng)關(guān)系.
終聞13861317631咨詢： 瓊脂糖凝膠電泳 -
鄂爾多斯市向載荷回復(fù)：
______ 只要你的樣品能落到樣品孔中,上樣孔里有氣泡,對電泳沒什么影響.如果制膠中,凝膠內(nèi)部產(chǎn)生氣泡,會對實(shí)驗結(jié)果有較大影響
