質(zhì)粒DNA電泳圖與基因組DNA電泳圖有什么區(qū)別？
質(zhì)粒DNA電泳圖與基因組DNA電泳圖的區(qū)別：
1、DNA顯色帶條數(shù)：質(zhì)粒DNA電泳有3條帶；而基因組DNA應(yīng)該只有一條帶或者兩條帶。
2、應(yīng)用技術(shù)：質(zhì)粒DNA電泳圖與基因組DNA電泳圖都是采用了凝膠電泳技術(shù)。
質(zhì)粒DNA電泳會有三條帶，最遠(yuǎn)的是線形DNA（lDNA）： 質(zhì)粒的兩條鏈均斷裂；線性分子；中間的是開環(huán)DNA（ocDNA）： 質(zhì)粒的一條鏈斷裂；松弛的環(huán)狀分子；共價閉合環(huán)狀cccDNA： 質(zhì)粒的兩條鏈沒有斷裂；超螺旋。質(zhì)粒跑出來必須是三條帶，只要的是最前端的那條帶，既CCCDNA。
基因組DNA電泳一般是1條帶，雖然在你抽提過程中也會發(fā)生斷裂，形成幾十至幾百kb的大片段。但是我們一般用1%的膠，無法區(qū)分不同大小的DNA，所以看起來像是一條帶。如果配成0.6%的膠再加lamda hindIII marker，適當(dāng)延長跑膠時間，就應(yīng)該會出現(xiàn)幾條帶了。
電泳的遷移率，取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型，分子量較小的DNA分子比分子量較大的DNA分子遷移要快些。這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離DNA片段的基本原理。
擴(kuò)展資料：
DNA電泳技術(shù)分離時影響其遷移速率的因素：
1、DNA的分子大小。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難于在凝膠孔隙中蠕行，因而遷移得越慢。
2、瓊脂糖濃度。一個給定大小的線狀DNA分子，其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數(shù)與凝膠濃度成線性關(guān)系。凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。
3、DNA分子的構(gòu)象。DNA分子處于不同構(gòu)象時，它在電場中移動距離不僅和分子量有關(guān)，還和它本身構(gòu)象有關(guān)。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中移動速度是不一樣的，超螺旋DNA移動最快，而開環(huán)雙鏈DNA移動最慢。
4、電源電壓。在低電壓時，線狀DNA片段的遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增加，不同分子量的DNA片段的遷移率將以不同的幅度增長，片段越大，因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大。要使大于2kb的DNA片段有效分離所加電壓不得超過5V/cm。
5、嵌入染料的存在。熒光染料溴化乙啶用于檢測瓊脂糖凝膠中的DNA，染料會嵌入到堆積的堿基對之間并拉長線狀和帶缺口的環(huán)狀DNA，使其剛性更強，還會使線狀DNA遷移率降低15%。
6、離子強度影響。電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。在沒有離子存在時(如誤用蒸餾水配制凝膠），電導(dǎo)率最小，DNA幾乎不移動，在高離子強度的緩沖液中（如誤加10×電泳緩沖液），則電導(dǎo)很高并明顯產(chǎn)熱，嚴(yán)重時會引起凝膠熔化或DNA變性。
參考資料來源：百度百科--凝膠電泳
參考資料來源：百度百科--質(zhì)粒
參考資料來源：百度百科--基因組DNA
DNA電泳圖結(jié)果分析
首先看第二泳道，能夠看見兩條帶，一般的質(zhì)粒跑完電泳都是這種情況，因為質(zhì)粒容易開鏈，變成線性的，或者是半線性半環(huán)狀，而環(huán)狀的比線性的跑的快，所以上面那條淺的應(yīng)該是開鏈的質(zhì)粒，下面的是環(huán)狀的質(zhì)粒，不過不要緊，一般都是這樣。看第三條泳帶，說明你的目的條帶大約在750bp。再看第四個泳帶...
...倆個電泳圖里的條帶(第一個是DNA,第二個圖是質(zhì)粒)越詳細(xì)越好,謝謝...
先說質(zhì)粒電泳圖。最上面發(fā)亮的是加樣孔，下面最亮的是未降解的RNA，中間那條亮度最低的是質(zhì)粒。幾點建議:1 一定要加marker，否則很難判斷大小，2 膠濃度應(yīng)該再小一點，3 跑得時間太短，4 加些DNAse free RNAse。再說DNA電泳圖。如果膠濃度和電泳時間都與質(zhì)粒電泳差不多，那么最上面和最下面的兩條...
請問質(zhì)粒DNA電泳的三條帶各是什么?
質(zhì)粒DNA原則上應(yīng)表現(xiàn)為一條帶，但在實際操作中，由于質(zhì)粒可能會部分降解成線形DNA，甚至完全降解成單鏈DNA，因此電泳結(jié)果中會出現(xiàn)三條帶。閉環(huán)形態(tài)的質(zhì)粒DNA在瓊脂糖凝膠中的遷移速率最快，而線形DNA則較慢，這使得在電泳圖譜中形成三條帶。質(zhì)粒根據(jù)在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制類型可分為兩類：嚴(yán)緊控制型和...
質(zhì)粒DNA提取及電泳分析實驗結(jié)果圖的分析,希望各位大俠盡力幫忙哦...
Marker保持穩(wěn)定，建議延長電泳時間或選擇更小分子量的Marker，以降低人為判斷的偏差。由于缺少上樣量、陽性對照及Marker的具體信息，無法進(jìn)行精確的定量分析，但從電泳圖的亮度來看，DNA的量顯然較為豐富。若lane4、lane5、lane6代表的是不同濃度的梯度樣品，則表明DNA的純度達(dá)到了非常高的水平。Marker位置...
dna電泳條帶怎么看?
DNA電泳條帶的解讀涉及多個方面，以下為詳細(xì)解析：1. 條帶數(shù)量：觀察DNA電泳條帶時，條帶的數(shù)量能夠提供DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的信息。例如，質(zhì)粒DNA通常在電泳上顯示為一到三條帶，這代表了不同的拓?fù)洚悩?gòu)體。如果出現(xiàn)多條帶，可能是由于DNA的降解或污染。2. 條帶位置：條帶在電泳膠中的位置揭示了DNA的分子量...
請問這個DNA電泳結(jié)果是什么情況?怎么分析?第一個是Marker
基因組DNA通常較大，大約會在Marker指示的20K附近。中間的條帶很可能是細(xì)菌攜帶的質(zhì)粒。不過，從整個泳道的信息來看，泳道中沒有條帶的地方出現(xiàn)了一些信號，這可能是由于提取過程中的RNA未被徹底清除，需要加入RNase進(jìn)行處理。綜上所述，這個電泳結(jié)果顯示出樣品可能存在一定的問題，需要針對具體樣品類型進(jìn)行...
用瓊脂糖凝膠電泳怎么檢測DNA質(zhì)量 什么是標(biāo)準(zhǔn)
在瓊脂糖凝膠電泳中，DNA的質(zhì)量可以通過觀察電泳條帶的形態(tài)和亮度來判斷。如果DNA已經(jīng)降解或者混有其他雜質(zhì)如蛋白質(zhì)和RNA，這些都可以通過電泳圖譜顯現(xiàn)出來。線性的單一DNA樣品通常會顯示出一條清晰的條帶，而質(zhì)粒則可能顯示出2到3條條帶。如果條帶變得寬而暗淡，或者呈現(xiàn)彌散狀態(tài)，這表明DNA可能經(jīng)歷了非...
質(zhì)粒DNA 的電泳圖譜為何有時只有一條帶譜,有時又有2-3條帶譜?
如果是在提取質(zhì)粒DNA時，或者是在對質(zhì)粒DNA進(jìn)行處理后進(jìn)行電泳，那么有時會有之前的酶之類的物質(zhì)的帶出現(xiàn)。所以會出現(xiàn)2到3條帶譜。
電泳能區(qū)別長度相同的線性和環(huán)狀質(zhì)粒嗎
：質(zhì)粒的兩條鏈均斷裂。線性分子。中間的是開環(huán)DNA（ocDNA）：質(zhì)粒的一條鏈斷裂。松弛的環(huán)狀分子。共價閉合環(huán)狀DNA（cccDNA）：質(zhì)粒的兩條鏈沒有斷裂。超螺旋。這是由于在質(zhì)粒提取過程中，機(jī)械力、酸堿度、試劑等的原因，使質(zhì)粒DNA鏈發(fā)生斷裂.而質(zhì)粒DNA相對于基因組DNA小很多，比較容易區(qū)分開。
細(xì)胞DNA電泳圖像如何分析
首先你不能把細(xì)胞作為樣品上核酸電泳的。如果是提取的總DNA，那么電泳圖像可以檢測DNA提取質(zhì)量。（可以由marker的亮度來估計提取DNA的濃度，可以通過拖尾的嚴(yán)重與否估計提取的質(zhì)量）如果提取的是質(zhì)粒，主要是看質(zhì)粒的質(zhì)量，一般是兩條帶，有時候是三條帶。分別代表 開環(huán) 超螺旋 和線性狀態(tài)。
相關(guān)評說：
都昌縣根切： ______ 一、實驗名稱:質(zhì)粒DNA的提取與純化,DNA瓊脂糖凝膠電泳 二、實驗原理: 1.質(zhì)粒DNA的提取: 質(zhì)粒是一類存在于幾乎所有細(xì)菌等微生物中染色體之外(細(xì)胞質(zhì)中)呈游離狀態(tài)的雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,能夠自主復(fù)制和穩(wěn)定遺傳,以超螺旋...
都昌縣根切： ______ 首先,重組后的質(zhì)粒肯定比載體大,可以通過電泳一定的區(qū)分,通過這個對比的話最好是酶切過后的 其次,因為你重組的片段是通過PCR擴(kuò)增出來的,所以你重組要是成功了,那么就可以用相同的引物擴(kuò)增出來,所以PCR做完了過后,電泳時會出現(xiàn)和目的條帶一樣大的條帶,反之則不成功 顯然這兩種方法第二種最靠譜,第一種情況由于質(zhì)粒較大,要是插入片段太小的話,可能分的不是很清楚,最后電泳的意義就在于看插入片段是否正確,并且理論上看是不是正確的插入方向
都昌縣根切： ______ 原因很多啦,要么就是你上的樣中沒有目標(biāo)條帶的DNA啊,變形么就是你做的膠不怎么好啊或者上樣液沒處理好啊電流控制啊,很多問題的
都昌縣根切： ______[答案] 蛋白污染會在電泳孔有亮帶,跑不出來. RNA污染會在最下邊,一團(tuán)彌散的亮帶,但DNA如果降解的話也有這種現(xiàn)象.
都昌縣根切： ______ 難道你忘了質(zhì)粒DNA的幾種形態(tài)么.質(zhì)粒電泳條帶一般是3條左右,其中一道兩條亮.
都昌縣根切： ______ 用堿裂解法提質(zhì)粒,基因組DNA會與細(xì)胞殘骸聚集,而小的質(zhì)粒DNA溶在水相中,通過離心就能除去;如果還擔(dān)心有少量基因組DNA污染,可以電泳后從膠中回收質(zhì)粒片段;用核酸外切酶也能消化掉線性的DNA,而環(huán)形和超螺旋的質(zhì)粒DNA則得以保留.
都昌縣根切： ______[答案] 這些東西后面都滅活了,不影響你后面的實驗,應(yīng)該沒關(guān)系zltj2008(站內(nèi)聯(lián)系TA)這應(yīng)該不是正規(guī)專門提質(zhì)粒的方法,這種方法就是把菌體裂解開,把包括基因組DNA和質(zhì)粒DNA都釋放出來,電泳時應(yīng)該都可以看到,然后可以做PCR檢測或酶切....
都昌縣根切： ______ 現(xiàn)在實驗室大多用的是提取試劑盒,如果自制溶液堿性過強會有可能出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象,蛋白沉降步驟不完全也會有可能導(dǎo)致基因組DNA降解出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象.類似于溶液方面的問題一般比較容易排除,而且比較容易改正. 電泳結(jié)果拖尾大部分原因與實驗操作有關(guān),在加入堿性溶液裂解細(xì)胞后操作需要輕柔,靜置時間不宜過長,劇烈震蕩以及靜置時間過長均可導(dǎo)致質(zhì)粒DNA斷裂,電泳結(jié)果中出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象. 有什么問題可以繼續(xù)追問,歡迎交流.
都昌縣根切： ______[答案] 方便把膠的照片發(fā)上來看看嗎? 會不會是DNA的緩沖液里帶了正電荷,緩沖液ph有沒有問題.用的是goldview還是EB.如果是EB的話也可能是染上了蛋白.溴酚藍(lán)的方向如果沒有問題就應(yīng)該是提取的問題了.marker跑出來的效果怎么樣.
都昌縣根切： ______ 我用了天根的膠回收試劑盒,回收的DNA 量非常的少最多的一個才9ng/?l 左右,我加了 50ul 的洗脫液.這個到底是出了什么問題呢?我回收的是下面那 3 條跑開的條帶,大小是500Bp 左右,下面小的Marker 都跑沒了,不知道是為什么,以前都...
