takara高保真酶
解菊15369547471咨詢(xún)： 如何才能選擇我需要的pcr酶? -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 看你PCR要做什么 如果測(cè)序,或者是PCR產(chǎn)物有下游應(yīng)用如構(gòu)建質(zhì)粒,要使用高保真酶 如果對(duì)于特異性要求較高,使用熱啟動(dòng)的 使用taqman探針,那就要有外切酶活性的taq酶 使用PCR建立隨機(jī)突變,或者進(jìn)行TA 克隆,必然不能用高保真酶 各種酶都有不同的作用,列舉不完. 主要還是要仔細(xì)研究相關(guān)技術(shù)原理 我見(jiàn)過(guò)有些人,沒(méi)仔細(xì)研究他實(shí)驗(yàn)的原理,用錯(cuò)酶,整整1個(gè)月做不出實(shí)驗(yàn)
解菊15369547471咨詢(xún)： prime STAR HS DNA Polymerase怎么樣? -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 我用過(guò),這個(gè)酶保真性非常好.但是你克隆測(cè)序的話是否需要用保真酶呢?
解菊15369547471咨詢(xún)： 基因定點(diǎn)突變使用taq聚合酶好還是pfu聚合酶好 -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 般taq酶沒(méi)5'-3'外切性現(xiàn)些酶比TAKARAEx-Taq5'-3'外切性主要減少錯(cuò)配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比較保真性介于ExPS間挺用擴(kuò)增效率沒(méi)
解菊15369547471咨詢(xún)： 如何提高PCR產(chǎn)物克隆的效率 -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 【TA 克隆的優(yōu)缺點(diǎn)】1、優(yōu)點(diǎn):(1)是目前克隆 PCR 產(chǎn)物最簡(jiǎn)便、快捷的方法.(2)不需使用含限制酶序列的引物,不需將 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行優(yōu)化,不需把 PCR 產(chǎn)物做平端處理,不需在 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物上加接頭,即可直接進(jìn)行克隆.(3)TA克隆選...
解菊15369547471咨詢(xún)： 請(qǐng)問(wèn)哪里能買(mǎi)到非洲豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒 -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 這種哪有配套試劑盒,直接找引物公司設(shè)計(jì)非洲豬瘟定量引物,然后配臺(tái)熒光定量?jī)x,再去訂購(gòu)熒光定量試劑.一般用寶生物的TB Green試劑盒
解菊15369547471咨詢(xún)： 有誰(shuí)能詳細(xì)說(shuō)一下全基因組Bisulfite Sequencing的流程 -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 亞硫酸氫鈉測(cè)序法(bisulfite genomic sequencing) 直接測(cè)序法是建立在MSP基礎(chǔ)上進(jìn)一步深入研究CpG島各個(gè)位點(diǎn)甲基化情況的方法.重亞硫酸鹽使DNA中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不變,行PCR擴(kuò)...
解菊15369547471咨詢(xún)： 怎樣可以將pcr產(chǎn)物3'端凸出的A堿基去掉? -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 用promega的pFu酶,PCR的序列是平滑的末端,沒(méi)有堿基A,pFu是高保真的酶
解菊15369547471咨詢(xún)： 為什么普通的聚合酶能擴(kuò),高保真酶pfu不能擴(kuò)啊 -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 可能是引物問(wèn)題,或者做個(gè)鎂離子濃度梯度看看
解菊15369547471咨詢(xún)： ta克隆的優(yōu)缺點(diǎn) -
咸豐縣桿回復(fù)：
______ 一、缺點(diǎn): 1、PCR產(chǎn)物的酶切和判斷比較困難. 2、另外酶切連接過(guò)程本身也相當(dāng)?shù)刭M(fèi)時(shí)費(fèi)力. 二、優(yōu)點(diǎn): 1、克隆PCR產(chǎn)物較簡(jiǎn)便、快捷的方法. 2、不需使用含限制酶序列的引物,不需將 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行優(yōu)化,不需把PCR產(chǎn)物做平端處理...
