瓊脂糖濃度和片段大小
凌雁13572441844咨詢： 你好,我想問(wèn)一下,有關(guān)瓊脂糖凝膠電泳的問(wèn)題. -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 瓊脂糖凝膠電泳只能分離20KD一下的片段?首先這個(gè)表述有問(wèn)題,不是20KD,KD是描述蛋白分子量的,應(yīng)該是DNA或者RNA片段20kb吧,瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長(zhǎng)度從200bp至近50kb的DNA片段...
凌雁13572441844咨詢： 瓊脂糖凝膠電泳275bp和240bp的片段能區(qū)分開(kāi)嗎 -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 要看目標(biāo)片段比說(shuō)一00bp二00bp容易區(qū)一900二000區(qū)報(bào)道說(shuō)區(qū)一-5堿基差異片段指幾十bp片
凌雁13572441844咨詢： 請(qǐng)說(shuō)出以下電泳用膠的區(qū)別 -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 普通DNA的分離一般采用0.8%~1%的瓊脂糖凝膠電泳 測(cè)序膠有兩種類型 以前的310類型的測(cè)序儀用的是銀染的聚丙烯酰胺凝膠電泳 膠濃度一般在6~8%3130或3730之類的新型測(cè)序儀用的是毛吸管的分離膠 如POP-7,POP-6,POP-4之類 這種膠相當(dāng)貴,自己沒(méi)有配方是配不起來(lái)的 都是買現(xiàn)成的膠 southern雜交的電泳一般是DNA用限制性內(nèi)切酶消化后,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離各酶解片段.分離大分子DNA片段(800-12000bp)用低濃度瓊脂糖(0.7%),分離小分子片段(500~1000bp)用高濃度瓊脂糖(1.0%),300-5000bp的片段則用1.3%的瓊脂糖凝膠
凌雁13572441844咨詢： 瓊脂糖凝膠電泳制膠與點(diǎn)樣時(shí)需注意的因素有哪些 -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 1. 根據(jù)片段大小配制不同濃度的膠(改變分辨率),片段越小,需要膠濃度越大. 2. 膠要現(xiàn)制先用. 3. 選擇合適的Marker. 4. 配膠的緩沖液與電泳緩沖液要是同一種,且濃度一致(1倍). 5. 點(diǎn)樣時(shí)要加入loading buffer,并注意,不要將樣點(diǎn)到點(diǎn)樣孔之外(飄樣),也不要將膠戳漏(漏樣). 6. 根據(jù)片段大小,及電泳檢測(cè)目的,選擇合適的電壓及電泳時(shí)間. 7. EB染色.可選擇制膠時(shí)加入EB(要在溶玩膠后,且溫度至室溫時(shí)(用手握住制膠容器,不燙手即可));或電泳結(jié)束后,將膠放入EB溶液中染色.
凌雁13572441844咨詢： 影響核酸泳動(dòng)距離的因素有哪些 -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 1、核酸的性質(zhì) 核酸的電荷量,分子大小,分子的空間構(gòu)象等決定了不同的核酸分子具有不同的遷移率.對(duì)于線狀雙鏈DNA分子,在凝膠電泳中,分子量的常用對(duì)數(shù)與泳動(dòng) 率成反比關(guān)系,一般雙鏈DNA基本上不存在影響遷移率的復(fù)雜構(gòu)象,但...
凌雁13572441844咨詢： 990bp的DNA片段與951bp的片段在瓊脂糖凝膠電泳中能否區(qū)分開(kāi)? -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 低熔點(diǎn)/凝點(diǎn)瓊脂糖可以區(qū)分(瓊脂糖膠濃度在6%):通過(guò)羥乙基化修飾的瓊脂糖在較低的溫度熔化,羥乙基化替代的程度決定準(zhǔn)確的熔化和凝結(jié)溫度.低熔點(diǎn)/凝點(diǎn)瓊脂糖主要用于DNA的快速回收,因?yàn)榇蠖鄶?shù)該類型瓊脂糖在65℃熔化,這個(gè)溫度遠(yuǎn)低于雙鏈DNA的解鏈溫度.這種特性使它還可以用于DNA的簡(jiǎn)單純化和酶處理;在熔化的凝膠中用核酸直接進(jìn)行細(xì)菌轉(zhuǎn)化.化學(xué)修飾的瓊脂糖比等濃度的標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖有更高的篩分能力.該發(fā)現(xiàn)使瓊脂糖的分辨力接近聚丙烯酰胺凝膠,因此可用于PCR產(chǎn)物、小片段DNA和小RNA(
凌雁13572441844咨詢： 電泳制膠的瓊脂糖含量為1%至2%的根據(jù)是什么? -
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______[答案] 電泳樣品片斷的大小,片斷大,含量小 因?yàn)?你的樣品要通過(guò)凝膠孔隙,才能跑膠
凌雁13572441844咨詢： 什么是瓊脂糖電泳的?其基本知識(shí)及操作方法是什么?不同形態(tài)的DNA?
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 以瓊脂糖凝膠作為支持介質(zhì)的電泳稱為瓊脂糖凝膠電泳.二、瓊脂糖凝膠電泳的準(zhǔn)備和操作方法 1 、制備瓊脂糖凝膠時(shí)注意避免產(chǎn)生氣泡 凝膠電泳分為垂直型和水平型,...
凌雁13572441844咨詢： 瓊脂的分子結(jié)構(gòu)式 -
班戈縣動(dòng)方案回復(fù)：
______ 瓊脂糖的基本結(jié)構(gòu)是由 1,3 連結(jié)的 B-D- 半乳呋喃糖和 1,4 連結(jié)的 3,6- 脫水 A-L- 半乳呋喃糖相間聯(lián)結(jié)而成.瓊脂糖在水中一般加熱到 90 ℃以上溶解,溫度下降到 35-40 ℃液體形成良好的半固體狀的凝膠 , 這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ).瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示,強(qiáng)度越高,凝膠性能越好.質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在 1200 克 / 厘米 2 以上( 1% 膠濃度).瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的因素都能導(dǎo)致凝膠性的破壞. 具體結(jié)構(gòu)式的圖請(qǐng)看這里,我貼不了圖:
