瓊脂糖凝膠怎么配制?
把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶于熱水,倒入玻璃杯中,冷卻制成的凝膠。融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí),30°C時(shí)凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。
制成的小顆粒用于凝膠過濾,適于用sephadex不能分級(jí)分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級(jí)分離細(xì)胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點(diǎn),有時(shí)用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。
擴(kuò)展資料:
瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂糖,瓊脂糖的熔點(diǎn)在62〜65°C之間,多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離。
瓊脂由瓊脂糖和瓊脂果膠兩部分組成:
作為膠凝劑的瓊脂糖是不含硫酸酯的非離子型多糖,是形成凝膠的組分,其大分子鏈鏈節(jié)著1,3苷鍵交替相連的β-D-半乳糖殘基和3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖殘基 。而瓊脂果膠是非凝膠部分,是帶有硫酸酯、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的復(fù)雜多糖,也是商業(yè)提取中力圖去掉的部分。
商品瓊脂一般帶有2%~7%的硫酸酯,0%~3%的丙酮酸醛及1%~3%的甲乙基。在工業(yè)上的瓊脂 色澤由白到微黃,具有膠質(zhì)感,無氣味或有輕微的特征性氣味,瓊脂不溶于冷水,易溶于沸水。
瓊脂系選用優(yōu)質(zhì)天然石花菜、江蘺菜、紫菜等海藻為原料,采用科學(xué)方法精煉提純的天然高分子多糖物質(zhì)。
瓊脂為親水性膠體,分有條狀和粉末狀,不溶于冷水,易溶于熱水。瓊脂在工業(yè)上具有獨(dú)特的重要性,瓊脂的濃度即使低至1%仍能形成相當(dāng)穩(wěn)定的凝膠,是食品工業(yè)、化學(xué)工業(yè)、醫(yī)學(xué)科研所必需之原料。
參考資料來源:百度百科-瓊脂糖凝膠
參考資料來源:百度百科-瓊脂
dna膠怎么配
它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學(xué)滅菌活處理。瓊脂糖 Agarose,縮寫為AG,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學(xué)結(jié)構(gòu)由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半...
如何配置瓊脂凝膠
在實(shí)驗(yàn)中,正確配置瓊脂凝膠是電泳實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。以下是小源分享的詳細(xì)步驟和注意事項(xiàng):首先,準(zhǔn)備材料:微波爐、錐形瓶、電子天平和瓊脂糖粉。安裝制膠器時(shí),確保制膠底板平整,樣品梳完全卡入卡槽,避免灌膠時(shí)出現(xiàn)問題。配制步驟如下:選擇合適的凝膠濃度,例如1%的濃度,需將1g瓊脂糖粉加入100ml的1X...
簡(jiǎn)要說一下1%濃度凝膠制作的方法
1%瓊脂糖:1g固體瓊脂糖 + 100ml TAE\/TBE緩沖液 微波爐加熱至透明(不渾濁)倒膠到膠版里面 插帶孔梳子 15分鐘涼至凝固 即可!
瓊脂糖凝膠配方
瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂 糖,瓊脂糖的熔點(diǎn)在62?65°C之間,融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí),30°C時(shí)凝固成膠。多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離。[1]中文名 瓊脂糖凝膠 外文名...
我想問跑瓊脂糖電泳時(shí),loading buffer 的配方?
一般瓊脂糖凝膠loading buffer 配成10倍貯存液,如下:20%(w\/v) Ficoll 4000.1mol\/L Na2EDTA,PH8.01.0%(w\/v)SDS0.25%(w\/v)溴酚蘭0.25%(w\/v)二甲苯青注意溶液為電泳緩沖液,用時(shí)加入上樣體積的十分之一就行了另外,買DN...
瓊脂糖能用tris-hcl溶解嗎
瓊脂糖不能直接用Tris-HCl溶解。瓊脂糖是許多實(shí)驗(yàn)中常用的固體支持物,用于DNA的分離和純化。通常,瓊脂糖是直接溶解在水中,而不是在Tris-HCl緩沖液中。此外,瓊脂糖凝膠電泳通常是在Tris-乙酸(TAE)或Tris-硼酸(TBE)緩沖液中進(jìn)行,而不是在Tris-HCl緩沖液中。
瓊脂糖凝膠電泳分離核酸分子的實(shí)驗(yàn)步驟大體有哪幾步
首先當(dāng)然是把核酸提取出來啦!接著就是制膠了,一般都是制濃度為1%的瓊脂糖膠,比如我們做20ml的膠,就是量20ml的TBE和稱取0.2g的瓊脂糖,微波爐加熱煮至透明無亮晶晶的小點(diǎn)(也就是瓊脂糖全部融化完,大概煮1min),等溫度降到60℃左右(放在你的手上感覺到很燙,但是能忍受10秒鐘就行了)...
瓊脂糖凝膠電泳的原理 瓊脂糖凝膠電泳的原理和方法
瓊脂糖凝膠電泳步驟:1、用蒸餾水將制膠工具洗干凈,準(zhǔn)備好制膠平板,用瓊脂將模具邊緣封閉,架好梳子;2、根據(jù)要分離的樣品(DNA)大小配制合適濃度的瓊脂糖凝膠。準(zhǔn)確的稱取一定量的瓊脂糖干粉,加入到合適體積的錐形瓶中,加入一定量的電泳緩沖液(30ml左右TAE);放入到微波爐內(nèi)加熱融化,冷卻片刻...
瓊脂糖凝膠電泳用巴比妥緩沖液,你做時(shí)是怎么配置的,直接買試劑還是緩沖...
我沒有使用過巴比妥緩沖液。我做瓊脂糖凝膠電泳通常使用的是TAE或者TBE。這兩種都是直接買10倍濃度溶液,用水稀釋后使用。實(shí)驗(yàn)用溶液一概而論的話,技術(shù)上來說,買試劑自配和買配好的緩沖液無差別。實(shí)用中如果有賣緩沖液,買來直接用比較方便。一般也認(rèn)為廠商大批量生產(chǎn),質(zhì)量控制較統(tǒng)一和穩(wěn)定。買...
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理和步驟
2. **配制瓊脂糖凝膠**:稱取0.5g瓊脂糖,加入40ml蒸餾水,微波爐內(nèi)加熱使其溶化均勻,待膠溫降至60-70℃時(shí),依次加入甲醛、10X MOPS緩沖液和溴化乙錠,混合均勻,然后灌制瓊脂糖凝膠。3. **樣品準(zhǔn)備**:使用DEPC處理過的500ul小離心管,按照特定順序加入試劑,包括10x MOPS緩沖液、甲醛、甲酰胺...
相關(guān)評(píng)說:
雁峰區(qū)主軸: ______ 這種膠相當(dāng)貴,自己沒有配方是配不起來的 都是買現(xiàn)成的膠 southern雜交的電泳一般是DNA用限制性內(nèi)切酶消化后,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離各酶解片段.分離大分子DNA片段(800-12000bp)用低濃度瓊脂糖(0.7%),分離...
雁峰區(qū)主軸: ______[答案] 一般瓊脂糖凝膠loading buffer 配成10倍貯存液,如下:20%(w/v) Ficoll 4000.1mol/L Na2EDTA,PH8.01.0%(w/v)SDS0.25%(w/v)溴酚蘭0.25%(w/v)二甲苯青注意溶液為電泳緩沖液,用時(shí)加入上樣體積的十分之一就行了另外,買DN...
雁峰區(qū)主軸: ______ 電泳法瓊脂糖凝膠電泳法操作法(1)制膠取瓊脂糖約0.2g,加水10ml,置水浴中加熱使溶脹完全,加溫?zé)岬拇姿徜圎}緩沖液(pH3.0)10ml,混勻,趁熱將膠液涂布于大小適宜(2.5cm*7.5cm或4cm*9cm)的玻板上,厚度約3mm,靜置,待凝膠結(jié)成無氣泡的均勻薄層,即得
雁峰區(qū)主軸: ______[答案] 1.選擇合適的Marker2.配膠的緩沖液與電泳緩沖液要是同一種,且濃度一致(1倍)3.點(diǎn)樣時(shí)要加入loading buffer,并注意,不要將樣點(diǎn)到點(diǎn)樣孔之外(飄樣),也不要將膠戳漏(漏樣)4.根據(jù)片段大小,及電泳檢測(cè)目的,選擇合適...
雁峰區(qū)主軸: ______ 是RT-PCR啊. 一、實(shí)驗(yàn)器具與材料: 1、移液槍:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸頭:1ml、200μl、20μl 3、勻漿管:5ml 4、吸頭臺(tái):放置1ml吸頭的一個(gè),放置20μl吸頭的一個(gè) 5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、試劑瓶:2個(gè)60ml的棕色...
雁峰區(qū)主軸: ______ 0.29g NaCl + 50mL TAE + 5uL GelRed 搖床上30min,之后將其倒入裝有1g瓊脂糖(矮胖杯的)的錐形瓶中,加蓋保鮮膜,扎多些孔跑氣,微波爐中加熱至沸(以10s為單位,大約6次)后,取出搖動(dòng)1分鐘,再進(jìn)入加熱至沸騰,冷卻至60℃倒膠,梳子在倒膠前插好. c(NaCl)≈ (0.2925 / 58.5)/ 0.050 = 0.1mol / L TAE原液為50*,取1體積50*TAE + 49體積的ddH2O配制1*TAE
雁峰區(qū)主軸: ______ 1.材料和試劑 (1)PH8.6,0.1M巴比妥——巴比妥鈉緩沖液 巴比妥鈉 10.3 g 巴比妥 1.84 g 硫柳汞 100 mg(防腐劑) 蒸餾水加熱溶解并定容至500ml (2)1%預(yù)復(fù)瓊脂(或瓊脂糖) 1g瓊脂(或瓊脂糖)加蒸餾水100ml溶化即可. (3)1%...
雁峰區(qū)主軸: ______ 多糖鏈上引入羥乙基、甲氧基等基團(tuán)后的瓊脂糖.由于其能在30℃左右成膠,約65℃熔化,熔化溫度低于大多數(shù)雙鏈DNA熔點(diǎn).利用低熔點(diǎn)瓊脂糖的這種性質(zhì)可以從凝膠中回收天然形式的DNA.低熔點(diǎn)瓊脂糖(Low Metling Agarose) HyAgarose? 瓊脂糖---低熔點(diǎn)瓊脂糖的世界標(biāo)準(zhǔn) ⊙應(yīng)用:·具有更高的分辨率,適用于DNA/RNA電泳. ·65℃以下凝膠融化,適宜膠回收. · 在37℃以下保持流動(dòng),適用于凝膠內(nèi)進(jìn)行的酶促反應(yīng)、組織培養(yǎng)、細(xì)胞克隆以及病毒空斑實(shí)驗(yàn)
雁峰區(qū)主軸: ______ 1. 根據(jù)片段大小配制不同濃度的膠(改變分辨率),片段越小,需要膠濃度越大. 2. 膠要現(xiàn)制先用. 3. 選擇合適的Marker. 4. 配膠的緩沖液與電泳緩沖液要是同一種,且濃度一致(1倍). 5. 點(diǎn)樣時(shí)要加入loading buffer,并注意,不要將樣點(diǎn)到點(diǎn)樣孔之外(飄樣),也不要將膠戳漏(漏樣). 6. 根據(jù)片段大小,及電泳檢測(cè)目的,選擇合適的電壓及電泳時(shí)間. 7. EB染色.可選擇制膠時(shí)加入EB(要在溶玩膠后,且溫度至室溫時(shí)(用手握住制膠容器,不燙手即可));或電泳結(jié)束后,將膠放入EB溶液中染色.