設(shè)計(jì)方案從自然篩選葡聚糖酶
(1) 分離培養(yǎng)基和液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基.分離培養(yǎng)基:葡聚糖3 g,NaNO3 0.3 g,K2HPO4 0.1 g,KCl 0.05 g,MgSO4•7H2O 0.05 g,F(xiàn)eSO4•7H2O 0.001g,瓊脂2 g,蒸餾水100 mL,自然pH 值.液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基即為分離培養(yǎng)基不加瓊脂即得.
(2) 初篩培養(yǎng)基.將剛果紅配制成4 g/L 的水溶液,每100 mL 分離培養(yǎng)基中加入剛果紅溶液1 mL即得.
(3) 菌種保存培養(yǎng)基.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基.
(4) 菌株鑒定培養(yǎng)基.改良察氏培養(yǎng)基,用葡萄糖替換蔗糖作為碳源.
2.方法
(1)菌種的分離
將土樣烘干,并制成1%的懸浮液,涂布到以葡聚糖為惟一碳源的瓊脂平板上,于30 ℃培養(yǎng)3~5 d,挑取生長(zhǎng)良好的菌落接種于斜面保存并
編號(hào).
(2)菌種的初篩和復(fù)篩
將分離出的菌種點(diǎn)接到初篩培養(yǎng)基平板上,置于30 ℃培養(yǎng).凡在菌落周圍能使剛果紅褪色形成透明圈的菌株,接種斜面保存.篩得到的菌株接種到裝有50 mL液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基的250 mL 三角瓶中,于28 ℃,150 r/min 搖瓶培養(yǎng)5 d.測(cè)葡聚糖酶活力,確定產(chǎn)酶活力高的菌株.
請(qǐng)參見文獻(xiàn)《快速篩選產(chǎn)β-葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育種》、《β-1,3-葡聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)酶條件》。
請(qǐng)參見文獻(xiàn)《快速篩選產(chǎn)β-葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育種》、《β-1,3-葡聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)酶條件》。
如果你說(shuō)的是一道高中生物題的話
它考的是選擇培養(yǎng)基的應(yīng)用
1.從自然界收集芽孢桿菌,
2.在只含葡聚糖及其他無(wú)機(jī)化合物的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)
3.篩選出可以正常生長(zhǎng)繁殖的芽孢桿菌進(jìn)行培養(yǎng)
基因誘導(dǎo)表達(dá)是指什么?
位于原生質(zhì)中的β-1,3-葡聚糖合成酶不是基因誘導(dǎo)后的從頭表達(dá),而是進(jìn)入細(xì)胞鈣離子流的直接活化。 水解酶基因的誘導(dǎo)表達(dá) 主要有幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶。 幾丁質(zhì)酶 真菌、細(xì)菌、病毒侵染或以激發(fā)子處理都誘導(dǎo)植物細(xì)胞中幾丁質(zhì)酶活性的增強(qiáng)。在此過(guò)程中乙烯被認(rèn)為是誘導(dǎo)作用的第二信使。通過(guò)乙烯生物合成的抑制...
纖維素酶發(fā)酵工藝
影響產(chǎn)酶的關(guān)鍵因素包括菌種、培養(yǎng)條件等。張中良等人(1997)通過(guò)均勻設(shè)計(jì)的研究發(fā)現(xiàn),綠色木霉在40%的粗纖維含量、pH為7.5、加水4倍、26-31℃的條件下培養(yǎng)45小時(shí),可以達(dá)到最大產(chǎn)酶量26mg\/g和CMC酶活力20mg\/g·h。王成華等人(1997)對(duì)里氏木霉91-3進(jìn)行了誘變篩選,最佳條件為7:3的秸稈粉與麥麩...
酶在輕工化學(xué)工業(yè)方面的應(yīng)用?
酶工程在現(xiàn)代人民生活中扮演著不可或缺的角色。 酶工程的應(yīng)用主要集中于食品工業(yè)、輕工業(yè)以及醫(yī)藥工業(yè)中。例如,固定化青霉酰胺酶可以連續(xù)裂解青霉素生產(chǎn);a一淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡糖異構(gòu)酶這三個(gè)酶連續(xù)作用于淀粉,就可以代替蔗糖生產(chǎn)出高果糖漿;蛋白酶用于皮革脫毛膠以及洗滌劑工業(yè);固定酶還可以...
β-葡聚糖酶的介紹
作用方式不同,可分為內(nèi)切型和外切型。前者存在于谷物種子、某些真菌和某些細(xì)菌中,能催化水解谷物細(xì)胞壁中的β-葡聚糖,其中包括內(nèi)切型β-1,4-葡聚糖酶、內(nèi)切型β-1,3-葡聚糖酶。后者存在于谷物種子中,其中又包括外切型β-1,4-葡聚糖酶、外切型β-1,3-葡聚糖酶。
病程相關(guān)蛋白指什么?
酸性蛋白在pH值2.8~3.5條件下很易抽提和分離,再如煙草受煙草花葉病毒侵染后用中性或偏堿性提取液可從過(guò)敏反應(yīng)的葉片中獲得4種PR蛋白,而用pH值為2.8的提取液可獲得10種。 分布 酸性PR蛋白一般存在于細(xì)胞間隙中,堿性PR蛋白主要存在于液泡中。馬鈴薯和大麥的堿性幾丁質(zhì)酶和堿性β-1,3-葡聚糖酶例外分別存在于胞間...
β-葡萄糖苷酶和β-葡聚糖苷酶是一種酶么
纖維素是一種復(fù)雜的多糖,是植物細(xì)胞壁的主要成分之一,而纖維二糖則是由兩個(gè)葡萄糖分子通過(guò)β-1,4糖苷鍵連接而成的小分子糖。β-葡聚糖苷酶能夠?qū)⒗w維素分解為纖維二糖,這在纖維素的消化和吸收過(guò)程中起到關(guān)鍵作用。β-葡萄糖苷酶則參與了生物體內(nèi)的糖代謝過(guò)程。糖苷鍵存在于多種糖類化合物中,β...
內(nèi)切葡聚糖酶的純化、性質(zhì)及編碼基因
低等真菌細(xì)胞壁中含有纖維素和幾丁質(zhì),因此纖維素酶即內(nèi)切葡聚酶能夠破壞這類真菌的細(xì)胞壁。迄今為止,已知的大多數(shù)纖維素酶是由細(xì)菌和真菌產(chǎn)生的,對(duì)里氏木霉的纖維素酶系統(tǒng)的研究是最多的。該酶至少產(chǎn)生兩種纖維二糖水解酶即Cel6A(CBH I)和Cel7A(CBH I),五種內(nèi)切葡聚糖酶(EGs),即 Cel...
植物體的葡聚糖酶和幾丁質(zhì)酶有什么作用?
植物的葡聚糖酶和幾丁質(zhì)酶可降解病原真菌細(xì)胞壁的葡聚糖和幾丁質(zhì)成分,因而與植物體內(nèi)病原菌的菌絲分解有關(guān)。在番茄植株中就觀察到黃萎輪枝孢菌體的分解,有人認(rèn)為這是番茄幾丁質(zhì)酶和b-1,3-葡聚糖酶作用的結(jié)果。
真菌細(xì)胞壁降解酶
真菌細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)、纖維素、葡聚糖、甘露聚糖等多糖、蛋白質(zhì)和類脂構(gòu)成,木霉菌可以產(chǎn)生大量這類物質(zhì)的降解酶類,直接破壞植物病原真菌的細(xì)胞壁,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。所有關(guān)于溶壁酶調(diào)控和表達(dá)的研究都是在不同碳源(如幾丁質(zhì)、葡聚糖、GlcNAc、真菌細(xì)胞壁)條件下的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的,在此條件下,誘導(dǎo)物...
內(nèi)切葡聚糖酶的介紹
內(nèi)切葡聚糖酶是纖維素酶系的一種。在纖維素酶系中,內(nèi)切葡聚糖酶(endo-1,4-β-D-glucanohydrolase, EC 3.2.1.4)是主要成分,它包含多種同工酶,歸結(jié)在以前的Cx分類中,可以將可溶性纖維素水解成還原性的寡糖。不同來(lái)源、不同類型的內(nèi)切葡聚糖酶的分子量、等電點(diǎn)、酶學(xué)特性及分子結(jié)構(gòu)也會(huì)...
相關(guān)評(píng)說(shuō):
成縣極位: ______ (1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶. (2)常用的接種工具是接種環(huán),操作時(shí)采用灼燒的方法滅菌. (3)剛果紅不與纖維二糖和葡萄糖發(fā)生反應(yīng),第一種方法會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜,第二種方法在倒平板時(shí). (4)剛果紅與纖維素反應(yīng)呈紅色,纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶會(huì)將纖維素分解而不能與剛果紅染液呈紅色,在菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈.為了確定是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn).纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定. 故答案為: (1)葡萄糖苷 (2)接種環(huán) 灼燒 (3)纖維二糖 葡萄糖 倒平板 第一種 (4)透明圈 發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 葡萄糖
成縣極位: ______ 先給你貼個(gè)東西你先看一下 希望對(duì)你有幫助將特定的外源基因構(gòu)建在植物表達(dá)載體中... 在抗病方面,本實(shí)驗(yàn)室藍(lán)海燕等構(gòu)建了包含β-1,3-葡聚糖酶基因及幾丁質(zhì)酶基因的雙...
成縣極位: ______[答案] 先給你貼個(gè)東西你先看一下 希望對(duì)你有幫助 將特定的外源基因構(gòu)建在植物表達(dá)載體中并轉(zhuǎn)入受體植物,并不是植物遺傳轉(zhuǎn)... (專利).在抗病方面,本實(shí)驗(yàn)室藍(lán)海燕等構(gòu)建了包含β-1,3-葡聚糖酶基因及幾丁質(zhì)酶基因的雙價(jià)植物表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入油...
成縣極位: ______ 化學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)指實(shí)驗(yàn)者在實(shí)施化學(xué)實(shí)驗(yàn)前,根據(jù)一定的化學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?運(yùn)用化學(xué)知識(shí)與技能,按照一定的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)的原理、儀器、裝置、步驟和方法等進(jìn)行合...
成縣極位: ______ 你只要配好淀粉篩選平板,其他都比較簡(jiǎn)單. 1.樣本采集:你可設(shè)計(jì)以富含淀粉的植物為主,這其中的細(xì)菌淀粉分解株分離率比較高,也可采集土壤等. 2.將樣本制成懸液,取一定量加入到富集培養(yǎng)基中(可根據(jù)情況自行配制不同的富集培養(yǎng)基...
成縣極位: ______ 還原糖法 這種方法是通過(guò)酶作用于化學(xué)合成或從自然界提取出來(lái)的底物來(lái)進(jìn)行測(cè)定的.非淀粉多糖酶與底物在特定的條件(溫度、pH值和底物濃度)下反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物為還原糖,在與顯色劑反應(yīng)后,通過(guò)比色確定還原糖的生成量,同時(shí)制作標(biāo)...
成縣極位: ______ 1.從環(huán)境中大量獲得微生物樣品,以不同稀釋度制備菌懸液 2.將不同稀釋度的不同菌懸液與目標(biāo)細(xì)菌共培養(yǎng),在平皿上做好標(biāo)記 3.觀察,篩選出有抗細(xì)菌作用的微生物(在微生物周圍出現(xiàn)沒有目標(biāo)細(xì)菌的抑菌圈) 4.進(jìn)一步純化篩選出來(lái)的微生物,再次進(jìn)行不同濃度下的抑菌試驗(yàn),以驗(yàn)證其抗菌作用.