dna電泳最少的上樣量
解學(xué)15885649315咨詢： 核酸電泳的注意事項(xiàng) -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 1. 瓊脂糖:不同廠家、不同批號(hào)的瓊脂糖,其雜質(zhì)含量不同,影響DNA的遷移及熒光背景的強(qiáng)度,應(yīng)有選擇地使用. 2. 凝膠的制備:凝膠中所加緩沖液應(yīng)與電泳槽中的相一致,溶解的凝膠應(yīng)及時(shí)倒入板中,避免倒入前凝固結(jié)塊.倒入板中的凝...
解學(xué)15885649315咨詢： DNA提取出來(lái),不進(jìn)行PCR,能直接跑電泳嗎?如果可以,那用的瓊脂糖凝膠是幾乘的? -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 一般情況下不行,直接從樣品中提取的DNA模板量都比較少,直接電泳的話容易出現(xiàn)假陰性的結(jié)果,如果你的實(shí)驗(yàn)還有其他的地方要用到DNA(比如核酸序列分析),直接從樣本提取尤其比較珍貴的樣本提取的DNA的量是滿足不了你整個(gè)實(shí)驗(yàn)的要求的
解學(xué)15885649315咨詢： 瓊脂糖跑DNA時(shí)無(wú)條帶 但另一方法證實(shí)有DNA,為什么?二甲苯青藍(lán)會(huì)不會(huì)影響EB觀察?電泳槽是垂直型. -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 二甲苯青一般不會(huì),1 要確認(rèn)你有沒(méi)有跑出去 2 DNA的量低于瓊脂糖膠-EB的檢出限,這樣你用PAGE-銀染可能有而EB沒(méi)有
解學(xué)15885649315咨詢： 細(xì)菌基因組dna電泳所用的Marker多大 -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 主要看你怎么做了,如果是采用高分子量DNA提取方法獲得的DNA則一般用50K的λ噬菌體DNA; 如果你是用常規(guī)DNA方法獲得的則20kb左右的λDNA+HindIII就可以了; 如果是脈沖電泳,則可能需要更大的marker.
解學(xué)15885649315咨詢： 1.泳道的質(zhì)粒DNA有幾條帶?為什么? -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 剛提出來(lái)的較純的質(zhì)粒應(yīng)該只有一條帶,很亮 過(guò)一段時(shí)間降解了之后,就有不同的帶了,還拖尾的 酶切質(zhì)粒的話也會(huì)出現(xiàn)不同的條帶. 如果質(zhì)粒提取的不好,含基因組的話,那么最上面的那條帶是基因組、下面的才是質(zhì)粒
解學(xué)15885649315咨詢： tbe適合分離什么大小的dna -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 首先原理差不多,具體細(xì)節(jié)差異還是有的. 跑DNA的話,可以參見(jiàn) 人家做AFLP的protocol,當(dāng)然也要看你想分離的片斷大小咯. 兩者都要用到丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED、APS(10%)但是跑DNA一般用 TBE(Tris 、硼酸、EDTA),還含尿素...
解學(xué)15885649315咨詢： DNA電泳常見(jiàn)問(wèn)題分析 -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ DNA電泳常見(jiàn)問(wèn)題分析 問(wèn)題 原因 解決辦法 DNA帶模糊 1) DNA降解 避免核酸酶污染 2) 電泳緩沖液陳舊 電泳緩沖液多次使用后,離子強(qiáng)度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果.建議經(jīng)常更換電泳緩沖液 3) 所用電泳條件不合適 電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過(guò)20V/cm,溫度
解學(xué)15885649315咨詢： 基因組DNA用Mse I酶切后,瓊脂糖電泳為什么沒(méi)有跑出彌散區(qū)?
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 大概是因?yàn)樵谀愕拿盖畜w系中DNA濃度比較低的緣故,不知道你電泳的上樣量是多少,如果只是幾u(yù)l,那肯定是跑不出來(lái)的. 如果樣品比較多的話,你可以做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn):加大些DNA的量(3~5ug),20ul體系酶切后全部用來(lái)上樣跑電泳,應(yīng)該就能看出酶切的效果了~ ……………… 詳細(xì)資料請(qǐng)參考:on http://www.bio1000.com/zt/dna/164670.html
解學(xué)15885649315咨詢： 質(zhì)粒提取,機(jī)器測(cè)得OD260/OD280=2.04,濃度780ug/mL,但是電泳檢測(cè)沒(méi)有條帶 -
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 估計(jì)有很多種可能,我簡(jiǎn)單說(shuō)幾種,你看看能不能對(duì)上號(hào) 一、電泳檢測(cè)時(shí)的上樣液濃度太大,導(dǎo)致的DNA無(wú)法進(jìn)入膠體中. 1、通常是loading buffer中水分揮發(fā)掉了濃度太大,點(diǎn)樣的時(shí)候會(huì)被槍頭帶出來(lái),或者就是濃度大使得DNA無(wú)法進(jìn)入瓊...
解學(xué)15885649315咨詢： 250bp DNA Ladder 每條帶的大小是多少?
永仁縣向齒廓回復(fù)：
______ 250 bp DNA Ladder Marker由DNA片段250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2250 bp、3000 bp、4500 bp組成,共8條帶.每次取5 μl電泳時(shí),每條帶的DNA量約為50 ng,其中1000 bp的DNA片段量約為150 ng,顯示亮帶.
